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ACE C18-PFP色谱柱介绍Ⅶ - UV和LC/MS兼容性的低流失
点击次数:144 发布时间:2019-04-02

许多相显示有键合相的流失,当基线稳定性受到影响时,这可以在梯度条件下被最清晰地观察到。

尽管大多数超纯C18相可以预期产生低柱流失,但是需要谨慎选择替代选择性的键合相,以确保在低UV波长或LC/MS下进行分析时柱流失不会引起不可预见的问题。

需要注意的是,色谱柱的绝对流失取决于许多因素,并且可能会随时间和系统而变化。

因此,在比较色谱柱流失时,必须在受控条件下进行。

 

 

本实例对超纯ACE C18色谱柱(顶部)的低流失特性与PFP色谱柱(中间)的高流失特性进行了比较。

ACE C18-PFP色谱柱(底部)显示其流失水平与ACE C18相当,尽管后者包含可以提供替代选择性的完整PFP官能团。

 

UV流失的比较

 

 

在相同条件下对更宽范围的色谱柱的进一步分析证实,刢先的高纯度C18柱品牌显示出相似的低水平色谱柱流失。

然而,传统上推荐改变选择性的替代键合相(即苯基,极性嵌入式,PFP表面化学物质)的评估显示,所有这些非C18色谱柱均有显著更高的流失。
ACE C18-PFP将低流失水平(典型的刢先C18色谱柱品牌)与替代选择性相结合,从而为分析者提供了有价值的方法开发工具。

当采用MS检测时,非C18相给分析者带来了传统上使用所出现的额外挑战。

在极端情况下,柱流失可能会污染检测器信号并掩盖重要分析物。
在以下实例中,在梯度运行的8-10分钟时段中监测柱流失,此时有机物的百分比增加至其最大水平,因此柱流失也是最高的。

MS Spectra(左边系列)提供了在该8-10分钟窗口中检测到流失的m/z裂解,而总离子色谱图(右边系列)阐明了在相同8-10分钟时间段内所获得的流失结果。

 

通过LC/MS分析,极性嵌入式色谱柱的TIC追踪和MS光谱(之前通过UV检测显示有显著流失)再次显示柱流失水平较高。

来自空白运行(在没有连接色谱柱的情况下开展)的MS光谱可以使背景系统流失量化。

ACE C18-PFP色谱柱和刢先的C18色谱柱均显示与空白运行相似的流失水平,这表明正在发生的柱流失可以忽略。

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