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C18反相HPLC色谱柱比较:(1)固定相规格
点击次数:454 发布时间:2017-09-07

常用 C18 相的比较数据

n 固定相规格

n 依据相对疏水性进行相比较

n 中性化合物的柱效比较

n 依据金属活性进行相比较

n 依据硅醇活性进行相分组

n 碱性化合物的柱效比较

n 依据硅醇活性和惰性进行相分类

引言

有多种不同的 C18 色谱柱可供选择,但为特定分离找到合适的色谱柱可能非常耗时且价格昂贵。
两种明显相似的 C18 相可以产生极为不同的结果。
例如,图 比较了在相同流动相条件下相同样品混合物在Hypersil HyPURITY C18 Symmetry C18 色谱柱上的分离结果。
即使 种色谱柱均装有新一代”C18 固定相,峰之间的带间距(选择性)仍极为不同。

 

图 1

 

明显相似的 C18 相可以产生极为不同的色谱分析结果。

 

Symmetry C18 和 Hypersil HyPURITY C18 都是新一代固定相。你将期望他们提供相似的性能, 在某些情况下确实如此。然而,在这里给出的例子中,您可以看到峰保留时间、选择性、甚至峰形的差异。


没有更多的信息,不可能预测将如

何比较不同固定相的性能。

C18 反相 HPLC 色谱柱的比较指南提供了常用 C18 色谱柱的基本比较信息,以帮助您在投入时间和金钱进行色谱测试之前更轻松地识别相似点和差异。

希望这些信息可以帮助您更快地找到合适的色谱柱。

本指南中仅评估了硅胶基质 C18键合相。

不包括其他键合相,如C8CN、苯基和极性嵌入相。

本指南不会标识整体“zui佳”色谱柱。zui适合某一应用的色谱柱不一定在其他应用中也zui有效。

而且,肯定没有一个单一色谱柱zui适合所有应用。

但是,本指南可帮助您识别性能良好的色谱柱,使您至少可以缩小色谱测定中的色谱柱数量。

您可能会发现本指南有助于您识别可以提供良好分离和性能的多个色谱柱。一直以来,人们总是希望为某一应用确定一种以上色谱柱,特别是当您正在进行常规分析时。

越来越多的色谱学家正寻求识别适合于其分析的替代品牌的HPLC 色谱柱。

为某一方法选择替代色谱柱可以降低由于色谱柱问(如从一个生产批次到另一个生产批次的选择性变化或供应商交货迟缓)而导致“停工时间”的风险。当替代某一方法时,寻找一种替代或备用色谱柱(将提供可接受选择性和性能)可能与寻找用于开发初始分离方法的正确色谱柱的花费和耗时一样。

我们希望本指南通过识别具有相似色谱特征的色谱柱,来使此工作更加容易。

 

  •  

固定相规格提供了有助于确定选择哪些相进行评估的基本信息。
例如,具有高表面积和高碳载量的相对疏水性化合物的保留通常要长于具有低表面积和低碳载量的相。
如果您正在分析大分子(如肽类和蛋白质),则大孔径(200-300Å)相通常比小孔径相更能提供良好的性能。
新型高纯度硅胶通常比较老的、更具酸性的硅胶更能为碱性化合物提供良好的峰形(参见图2
然而,固定相规格不会给您提
供足够的信息来准确预测保留值或带间距(选择性)。
当分离极性化合物时尤其如此。

图 2

高纯度硅胶为碱性化合物提供更佳的峰形

阳离子化合物和硅胶固定相载体表面上的酸 性硅醇位点之间的相互作用可以造成滞留和 峰拖尾。
通常可以预期用高纯度硅胶(较少酸 性硅胶)制备的相可以为碱性化合物提供更佳 的峰形。

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